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細(xì)胞復(fù)蘇有何注意事項？

細(xì)胞復(fù)蘇是指將凍存在液氮或者-70℃冰箱中的細(xì)胞解凍之后重新培養(yǎng)，細(xì)胞恢復(fù)生長的過程。那么你知道在細(xì)胞復(fù)蘇過程中有何注意事項嗎？讓我們一起來看看吧！1.取凍存細(xì)胞時應(yīng)做好防護(hù)措施，戴好防凍手套，護(hù)目鏡。如果凍存管密封不嚴(yán)，液氮可被吸入。由于解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，將可能發(fā)生爆炸。2.細(xì)胞放入水浴中復(fù)蘇時注意用鑷子夾住細(xì)胞凍存管并在水浴中不時晃動，使其受熱均勻，且速度越快越好，這樣可以最大限度的保存細(xì)胞活力，并防止水浴鍋的水進(jìn)入細(xì)胞凍存管造成細(xì)胞污染。3.打開細(xì)胞凍存管之...

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什么是原代細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞生長曲線？

你知道什么是原代細(xì)胞培養(yǎng)，和細(xì)胞生長曲線嗎？，讓我們一起來看看吧！一、原代細(xì)胞培養(yǎng)原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細(xì)胞進(jìn)行的shou次培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)離體時間短，遺傳性狀和體內(nèi)細(xì)胞相似，適于做細(xì)胞形態(tài)、功能和分化等研究。較為嚴(yán)格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì)，如果是正常細(xì)胞，仍然保留二倍體數(shù)。但實際上，通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。常用的原代培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細(xì)胞培養(yǎng)。一、細(xì)胞生長曲線細(xì)胞生長曲線是測定細(xì)胞絕對...

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如何選擇熒光定量PCR中的對照？

對照的目的是對檢測的各個環(huán)節(jié)進(jìn)行監(jiān)控，因此我們按照檢測的流程對對照進(jìn)行梳理。那么我們應(yīng)該如何選擇熒光定量PCR中的對照呢？讓我們一起來看看吧！一、陽性對照和陰性對照陽性對照和陰性對照是指在相同的處理條件下，比如一份已知的感染樣品和一份已知的未感染樣品，都進(jìn)行了提取和擴(kuò)增最終獲得了陽性結(jié)果和陰性結(jié)果。陰陽性對照強調(diào)處理過程與樣品一致，并且有明確的預(yù)期結(jié)果。二、擴(kuò)增對照我們通常說的陽性對照和陰性對照指的是擴(kuò)增試劑盒中附帶的不需要提取的陽性對照和陰性對照，更準(zhǔn)確的定義應(yīng)該是擴(kuò)增陽性...

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你知道熒光定量PCR的應(yīng)用嗎？

熒光定量PCR（Real-timePCR），是指在PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，通過對擴(kuò)增反應(yīng)中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。那么你知道熒光定量PCR的應(yīng)用嗎？讓我們一起來看看吧！一、分子生物學(xué)研究1.核酸定量分析：對傳染性疾病進(jìn)行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的檢測,比如近期流行的甲型H1N1流感，轉(zhuǎn)基因動植物基因拷貝數(shù)的檢測，RNAi基因失活率的檢測等。2.基因表達(dá)差異分析：比較經(jīng)過不同處理樣本之間特定基因的表達(dá)差...

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你知道細(xì)胞凍存的原理和實驗步驟嗎？

細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常用技術(shù)。那么你知道細(xì)胞凍存的原理和實驗步驟嗎？讓我們一起來看看吧！原理：將細(xì)胞放在-196℃液氮中，可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)，減少細(xì)胞代謝，理論上儲存時間幾乎是無限的。最佳的冷凍條件是盡可能地降低細(xì)胞內(nèi)的晶體形成，減少細(xì)胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對細(xì)胞造成的低溫?fù)p傷。上述要求可通過下列方法獲得：1.緩慢冷凍，使細(xì)胞內(nèi)水分離開細(xì)胞，但不可太慢，以避免冰晶形成；2.用親水的低溫保護(hù)劑排除水分；3.在盡可能低的溫度下保存細(xì)胞，降低高濃度鹽對冰中蛋白質(zhì)變性的...

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